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聚丙烯酰胺凝膠常用的催化聚合方法有哪些?-蘇州安嘉
發布時間:2021-10-27 11:06:29 瀏覽 354次 鞏義市維納凈水材料有限公司

聚丙烯酰胺凝膠電泳簡稱PAGE(凝膠),它以聚丙烯酰胺凝膠為支持介質。聚丙烯酰胺 凝膠由單體丙烯酰胺(CH2=)和亞甲基雙丙烯酰胺(CH2(=CH2) 2 N,N'-de)聚合而成,這個聚合過程需要自由基催化才能完成。有有兩種常用的催化聚合方法:化學聚合和光聚合?;瘜W聚合通常是加入催化劑過硫酸銨(AP)和促進劑四甲基乙二胺(),四甲基乙二胺胺催化過硫酸銨產生自由基:R·代表自由基,M代表丙烯酰胺單體,使乙烯基“CH2=CH-”一一聚合形成丙烯酰胺長鏈,同時亞甲基雙丙烯酰胺在不斷延伸的丙烯酰胺鏈之間形成亞甲基鍵交聯,從而形成交聯的三維網絡結構。氧氣對自由基有清除作用,因此通常在聚合前必須泵送凝膠溶液。丙烯酰胺 另一種聚合方法是光聚合。催化劑是核黃素。核黃素在光照下能產生自由基催化聚合反應。一般在光照2-3小時后即可完成聚合反應。丙烯酰胺 另一種聚合方法是光聚合。催化劑是核黃素。核黃素在光照下能產生自由基催化聚合反應。一般在光照2-3小時后即可完成聚合反應。丙烯酰胺 另一種聚合方法是光聚合。催化劑是核黃素。核黃素在光照下能產生自由基催化聚合反應。一般在光照2-3小時后即可完成聚合反應。

聚丙烯酰胺 可以通過改變丙烯酰胺和亞甲基雙丙烯酰胺的濃度來控制凝膠的孔徑。丙烯酰胺的濃度可以在3%到30%之間。低濃度凝膠具有較大的孔徑。例如3%聚丙烯酰胺凝膠對蛋白質無明顯阻礙,可用于平面等電聚焦或SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳濃縮凝膠,也可用于分離DNA;高濃度凝膠具有較小的孔徑,可作為蛋白質的分子篩,可用于根據蛋白質的分子量分離蛋白質的電泳。例如10%-20%的凝膠常用于SDS -聚丙烯酰胺 凝膠電泳的分離膠。

聚合聚丙烯酰胺凝膠的強度、彈性、透明度、粘度和孔徑取決于兩個重要參數T和C。T是丙烯酰胺和亞甲基雙丙烯酰胺兩種單體的總百分比。專注。C為與T相關的交聯百分比。T和C的計算公式為:C=6.5-0.3T 上式中a為丙烯酰胺的克數,b為亞甲基雙丙烯酰胺的克數,m為水或緩沖液。液體體積(毫升)。公式中a與b的比例很重要。對于柔軟且完全透明的凝膠,a與b的重量比應在30左右。選擇T和C的經驗公式為:該公式可用于計算T為5%至20%時的凝膠組成。C 的值不是很嚴格。大多數情況下,可變范圍約為±1%。當C不變時,凝膠的有效孔徑隨T的增加而減小。當T不變時,C為4%時,有效孔徑最小,當C大于或小于4%時,有效孔徑變大。當C大于5%時,凝膠變脆聚丙烯酰胺廠家,不適合使用。實驗中最常用的C是2.6%和3%。30% 的丙烯酰胺水溶液在 4°C 下可保存 1 個月。在儲存過程中,丙烯酰胺會水解成丙烯酸,這會增加電泳過程中的電滲,減慢電泳的流動性。有效孔徑最小,當C大于或小于4%時,有效孔徑變大。當C大于5%時,凝膠變脆,不適合使用。實驗中最常用的C是2.6%和3%。30% 的丙烯酰胺水溶液在 4°C 下可保存 1 個月。在儲存過程中聚丙烯酰胺的水溶液聚合,丙烯酰胺會水解成丙烯酸,這會增加電泳過程中的電滲,減慢電泳的流動性。有效孔徑最小,當C大于或小于4%時,有效孔徑變大。當C大于5%時,凝膠變脆,不適合使用。實驗中最常用的C是2.6%和3%。30% 的丙烯酰胺水溶液在 4°C 下可保存 1 個月。在儲存過程中,丙烯酰胺會水解成丙烯酸,這會增加電泳過程中的電滲,減慢電泳的流動性。

丙烯酰胺和亞甲基雙丙烯酰胺是對中樞神經系統有毒的藥物。操作時避免直接接觸皮膚聚丙烯酰胺的水溶液聚合,但聚合后無毒。沒有SDS的天然陽離子聚丙烯酰胺凝膠電泳可以在電泳過程中保持生物大分子的自然形狀和電荷。它們的分離是基于它們的電泳遷移率和凝膠分子篩效應的差異。獲得高分辨率,尤其是電泳分離后,可以保持蛋白質、酶等生物大分子的生物活性,對生物大分子的鑒定具有重要意義。該方法是在凝膠上進行兩個相同的樣品。電泳后,將凝膠切成兩半。一半用于活性染色以識別特定的生物大分子,另一半用于對所有樣品進行染色,以分析樣品中生物大分子的種類和類型。內容。

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